=== Citrat Medium im OLGA === **Wird u.a. verwendet für:** -Selektionsmedium für Mikroorganismen (MO), welche Citrat als alleinige C-Quelle verwerten können. -Bunte Reihe -Anzucht von Schimmelpilzen **Originalrezept** H2O 1L NaCl 5g Na3Citrat 2g Ammoniumdihydrogenphosphat 1g TriKaliumphosphat 1g Magnesiumsulfat 0,2g Bromthymolblau 0,08g Agar 15g pH 6,9 (+/-2) OLGA Rezept: |Diammoniumsulfat 0,22 g| |Kaliumdihydrogenphosphat 1,824 g| |Magnesiumchlorid 0,158 g| |Bromthymolblau 80 mg| |NaCl 4,806 g| |Zitronensäure 1,489 g| |NaOH 1,063 g| |KOH 41 mg| |Ammoniak (25%) 0,407 mL| |mit ddH20 auf 1 L| **Durchführung** Alle wasserlöslichen Komponenten bis auf Agar einwiegen und in entsprechend großes Gefäß überführen (optional: Einwaage protokollieren). Dest. Wasser zugeben, wenn alles aufgelöst ist pH-Wert messen (soll zwischen 6 und 7 sein, Optimum ~6,9 / 7) Agar zugeben Autoklavieren Platten gießen Beachte: Vorsichtiges Arbeiten mit NaOH, KOH (stark ätzend) und NH3 (ätzend, gasförmig) Genaues Arbeiten mit NaOH, KOH, NH3 und Zitronensäure (wegen pH-Wert, bei zu saurem Medium verfestigt sich Agar nicht) als Platten begrenzte Lagerfähigkeit, nach mehreren Tagen schwache Umfärbung nach blau auch ohne bakterielles Wachstum In dicht verschlossenen Schottflaschen Monate haltbar **Auswertung:** Platten haben grüne Farbe, bei Wachstum und Stoffwechsel erfolgt Alkalisierung und Farbumschlag nach blau Wachstum und Farbumschlag oder auch Wachstum ohne Farbumschlag als positiv bewerten Kein Wachstum/schwacher Farbumschlag ohne Wachstum als negativ bewerten Bedarf: Pipette Chemikalien Petrischalen Autoklav/Druckkochtopf Waage **Diskussion:** Rezept ist mangels Chemikalien für Originalzusammensetzung entstanden und ausgehend von dessen Ionenkonzentration berechnet, Abweichungen bei K+ und PO4 3- Ionen Ausführung umständlicher und zeitaufwändiger als im Original, aber funktioniert und entsprechende Chemikalien sind im OLGA vorhanden